2014年 第16卷 第9期
大菱鲆免疫球蛋白M(IgM)单克隆抗体的制备与特性鉴定
1. 中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室，山东青岛 266071；
2. 河南省农业科学院，河南省动物免疫学重点实验室，郑州 450002；
3. 四川省富顺县水产渔政局，四川富顺 643200
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摘要
应用细胞工程技术研制大菱鲆免疫球蛋白M(immunoglobulin M，IgM)的单克隆抗体并分析其免疫学特性。小鼠骨髓瘤细胞NS0 与经IgM免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合，经过反复有限稀释法克隆，筛选获得4 株抗大菱鲆IgM的单克隆抗体杂交瘤细胞株，分别为B1D1、D5C2、E1B2 和F4A1。经小鼠腹水扩大生产后，单抗效价为1∶1.024×106检测灵敏度为32 ng/mL。Western blot 分析表明，获得的单抗与IgM 重链区特异性结合。交叉结果显示，单抗与大菱鲆血清呈强阳性反应，与褐牙鲆、红鳍东方鲀、许氏平鲉、六线鱼、鲈鱼均呈微弱阳性反应，而与半滑舌鳎、鲤鱼、鲫鱼、草鱼、鳙鱼的血清无交叉反应。本研究制备的大菱鲆IgM单克隆抗体效价高、灵敏度高、特异性强，适合用于大菱鲆免疫学相关研究和生产实际应用。
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图1
图2
参考文献
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